INFLUENCIA DE LA FLUIDEZ DE LA MEMBRANA SOBRE LA ATPasa DEPENDIENTE DE Ca²⁺ DEL RETÍCULO SARCOPLÁSMICO DE MÚSCULO ESQUELÉTICO

Resumen

Se ha utilizado DMPC o DPPC para reconstituir Ca²⁺ -ATPasa de retículo sarcoplásmico y así disponer de un sistema lípido-proteico que contenga un único tipo de fosfolípido y un único tipo de proteína. Para estudiar el efecto del entorno lipídico sobre la proteína se han medido los cambios que tienen lugar en la actividad enzimática al variar la temperatura y la composición lipídica de la membrana. Los datos obtenidos mediante la variación de la actividad ATPasa con la temperatura revelan un aumento de la energía de activación a la temperatura de transición del fosfolípido y también a una temperatura inferior, a la cual tiene lugar la fusión de agregados lípido-proteicos. La dependencia de la actividad de la Ca²⁺ -ATPasa reconstituida con DPPC con la concentración de sustrato (ATP) no sigue el modelo de Michaelis-Menten. Se propone un modelo cinético en el cual tiene lugar una activación por exceso de sustrato. Al estudiar la variación de los parámetros cinéticos asociados al modelo propuesto encontramos que todos ellos aumentan considerablemente a aproximadamente 30ºC. temperatura por debajo de la temperatura de transición del DPPC (41ºC ). A esta temperatura tiene lugar la fusión de los agregados lipoproteicos ricos en proteína cuando el lípido utilizado es el DPPC.