Clonación, expresión, caracterización y modelado de esterasas putativas de Corynebacterium glutamicum ATTC 13032
Abstract
El objetivo de este trabajo fue clonar, expresar, purificar y caracte-
rizar algunos genes de Corynebacterium glutamicum ATCC13032,
identificados como enzimas de la superfamilia de las esterasas/li-
pasas. De todos los genes clonados, solo se pudo estudiar la pro-
teína codificada por el gen Cg2528. Se purificó y caracterizó la
proteína. Su máxima actividad la presentó 40 oC y a pH 8. Presen-
tó una gran estabilidad en presencia de disolventes orgánicos co-
mo el DMSO y el metanol. Con respecto al análisis cinético, pre-
sentó una mayor actividad sobre los p-nitrofenil ésteres y los nafti-
los que sobre el S-methiltiobutanoato. Se dilucidó la triada catalíti-
ca alineando la secuencia de aminoácidos. La estructura tridimen-
sional se predijo usando la esterasa (2OGS) de Geobacillus stea-
rothermophilus como molde.
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