Desarrollo de métodos rápidos y sencillos para la purificación de haptoglobina y ceruloplasmina porcina

Resumen

En el presente trabajo se describen dos métodos sencillos y rápidos para la purificación de la haptoglobina (Hp) y ceruloplasmina (CP). La Hp fue purificada mediante precipitación con amonio sulfato y poserior cromatografía en gel mediante un sistema de FPLC y columna de Superdex-200. La proteína obtenida mostró en cromatografía en gel de poliacrilamida, bajo condiciones reductoras, dos bandas con un peso molecular de 44 kDa y 12,9 kDa correspondientes a las dos cadenas pesadas (β) y las dos cadenas ligeras (α) de las estructura de la Hp, respectivamente. La ceruloplasmina (CP) fue purificada en un paso de cromatografía de afinidad en gel de sefarosa modificada, seguida de filtración en gel en columna de Superdex-200. El peso molecular de la proteína, estimado por electroforesis en gel de poliacrilamida, fue de aproximadamente 150 kDa. En conclusión, han sido desarrollados dos nuevos protocolos para la purificación de la Hp y Cp porcina, siendo más rápidos y menos exigentes técnicamente que los anteriormente descritos. Este trabajo puede representar una interesante guía y ser de ayuda para obtener proteína pura para ser usada como material estándar especie-específico y para la producción de anticuerpos específicos.